茂师兄带你做实验大鼠颈动脉球囊损伤模

2017-3-21 来源:不详 浏览次数:

由球囊的机械破坏可造成血管内膜内皮细胞层脱落和血管壁膨胀损伤。损伤引起平滑肌层增殖与迁移以及凋亡、部分血管内皮细胞再生、基质合成增强、心内膜的侵入与重建等病理生理学进程。因此大鼠颈动脉球囊损伤模型被广泛用于研究动脉损伤中的病理及分子生物学机制的研究。今天,我们就一起来看看如何构建这个损伤模型吧!

实验准备

球囊准备

选用1.25×15mm扩张球囊,将球囊尖端软头剪成一小斜面,用0.mm的PTCA导丝,插入球囊侧孔,直至距球囊尖端2mm处,并涂抹少许石蜡油,连接压力泵,维持球囊内压力2ATM,放置旁边备用。

图1.与1ml注射器链接的动脉取栓球囊导管;还有可标准化扩张球囊的压力泵。

大鼠准备

SD大鼠(约g)大鼠均以10%水合氯醛mg/kg腹腔注射,若剂量不足,以mg/kg逐渐追加,同时辅以尾静脉低分子肝素μ/kg注射。

模型构建

备皮-暴露

手术操作台仰卧位固定大鼠,颈部备皮,取颈部正中偏左3mm切开皮肤(便于避开甲状腺与颌下腺),切口长约2.5~3.5cm,钝性分离皮下组织与肌肉。

分离动脉

1.在左侧气管旁寻找左颈总动脉,用弯镊子将周围肌肉钝性分离,同时将颈总动脉伴行的迷走神经和交感神经分离,分离血管鞘,在血管的下方穿4号丝线备用。

2.轻轻提起该线,继续往上剥离左颈总动脉,直到左颈内动脉、左颈外动脉分叉处,然后继续剥离左颈外动脉,剥离约5mm,其下穿两根4号丝线,结扎远端,切勿剪断该结扎线,另一根线放置近端备用。

球囊操作(图2-4)

1.此时提起两根线,颈外动脉下垫一张开的镊子,将血管蹦紧,在靠近血管远端结扎处,剪开V型小口,V型切口侧有眼科镊子夹提血管壁,同时提起三根丝线,暂时阻断颈动脉血流,使颈总动脉与颈外动脉大致成一直线,用准备好了的球囊沿小口处插入颈外动脉,继续顺着血管往下插,直至插入到颈总动脉约2~3cm处,调节压力泵以6~8ATM扩张球囊,放松丝线,恢复血液供应。

2.重复来回缓慢抽动球囊3次后,撤出球囊,靠近颈总动脉分叉处结扎颈外动脉近端,抽去颈总动脉处丝线,恢复动脉血流,同时查看颈总动脉及颈内动脉是否充盈搏动良好。

图2.大鼠颈动脉解剖图:丝线、止血钳放置、膨胀位点、结扎位置标识;LCC:left







































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