MCA0middlecerebrala
2017-3-24 来源:不详 浏览次数:次经过师姐前期的准备和一个月来我们的学习准备,今天对大鼠脑缺血的造模的预实验如期开展,现将今天的收获总结如下:
一、实验
(一)大鼠准备
10只大鼠,禁食一天,由于大鼠比较大(-g)正常脑梗造模的老鼠要求是(-g)
(二)用物准备
大鼠、鱼线(2.5mm)、手术缝合针、碘伏、干棉球、酒精棉球、10%水合氯醛+注射器、棉签、弯盘(内有手术器材)、自制拉钩(皮筋+曲别针+大头针)
(三)实验过程
麻醉:10%水合氯醛老鼠g/0.3ml
抓取老鼠:一人抓取老鼠(一手大拇指和食指捏住耳朵双耳。同时手背紧贴老鼠的后背,另一手抓住老鼠的尾巴),另一个人手持注射器给老鼠进行腹腔注射进行麻醉
麻醉后老鼠绑在手术台上
碘伏消毒老鼠的手术野,切开皮肤(部位:气管旁开大概1cm,旁开颈部正中气管),钝性分离皮下组织后可见颌下腺,颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉均在颌下腺下方;
分离组织时候注意不要损失到迷走神经;由于大鼠的动脉较小,在分离过程中需小心,以免动脉破裂等;
分离出颈总、颈外、颈内动脉,结扎颈总动脉(系活结);颈外动脉(系活结),颈内动脉(系死结,但是此时先不打死结,待到插鱼线后再系紧)
用眼科剪在颈内动脉剪一小口,止血后,从剪口插入鱼线2cm,再系紧颈内动脉那条结扎线。
移走颈总动脉、颈外动脉的结扎线,剪去颈内动脉结扎线的多余的线,后给大鼠进行无菌缝合术。
2小时后观察大鼠的情况。如果大鼠左爪不能伸展(完全醒后可见绕圈或追尾、倾倒),则造模成功。
由于这类造模大鼠死亡率高,
二、实验总结
在多次选择手术野发现,左侧颈总动脉、颈内动脉、颈外动脉相对右侧要粗,在造模时候可选左侧动脉;
在切开皮肤时候,可选择用止血钳和手术剪进行切开,剥离组织过程中,使用弯钳和玻璃分针进行剥离,这样可以减少或避免大鼠动脉的破裂而引起大鼠的大出血;
结扎颈总动脉、颈内动脉、颈外动脉后,我们先开始是在颈内动脉剪一小口,后插入鱼线,这个过程相当重要。个人插鱼线的经验是拿鱼线时,尽量靠近鱼线线头的地方,然后对着剪口往里插鱼线,成功率会比较高。在这步,今天总共插了4只大鼠,成功了3只。
由于颈总动脉比颈内动脉粗点,可以选择在颈总动脉剪小口后插入鱼线,前提是要对颈总动脉结扎好,避免大量的出血。
准备的水合氯醛一定要密闭。由于水合氯醛有吸水性,容易影响药液的配置,进而影响麻醉的进程、
在给大鼠进行腹腔注射时候,要回抽后再进行注射。最好用5ML的注射器,避免弯针。
动物实验过程整个团队的配合非常重要,非常考验彼此间的默契。
由于MCAO的造模难度比较大,大鼠死亡率非常高,多做多学。
感谢导师的鼓励、曾平的指导帮助、大师姐一个月来每天的辛苦,我们完成了预实验,今天的收获非常大。
.6.27于贵阳中医学院大学城校区
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